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    免疫組化服務

    簡要描述:免疫組化服務
    1、 石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸餾水洗。

    • 產品型號:茁彩生物
    • 廠商性質:生產廠家
    • 更新時間:2024-09-29
    • 訪  問  量:4917
    詳情介紹


    免疫組化服務實驗收費標準:

    項目編號項目名稱計價單位單價

    ZC1068

    免疫組化

    35元



    實驗結果展示:

    免疫組化服務


    免疫組化服務實驗流程:

      石蠟切片免疫組化實驗步驟:

          1、 石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸餾水洗。

          2、 抗原修復:組織切片置于盛滿EDTA抗原修復緩沖液(PH9.0)的修復盒中于微波爐內進行抗原修復,中火8min至沸,停火8min保溫再轉中低火7min,此過程中應防止緩沖液過度蒸發,切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。

          3、 阻斷內源性過氧化物酶:切片放入3%過氧化|氫溶液(雙氧水:純水=1:9),室溫避光孵育25 min,將玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。

          4、 BSA或者血清封閉:切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫圈(防止抗體流走),在圈內滴加用3%BSA或者10%正常兔血清均勻覆蓋組織,室溫封閉30min。(一抗是山羊來源用10%正常兔血清封閉,一抗其它來源的用3%BSA封閉)

          5、 加一抗:輕輕甩掉封閉液,在切片上滴加PBS按一定比例配好的一抗,切片平放于濕盒內4°C孵育過夜。(濕盒內加少量水防止抗體蒸發)

          6、 加二抗:玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加與一抗相應種屬的二抗(HRP標記)覆蓋組織,室溫孵育50min。

          7、 DAB顯色:玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下控制顯色時間,陽性為棕黃色,自來水沖洗切片終止顯色。

          8、 復染細胞核:Harris蘇木素復染3min左右,自來水洗,1%的鹽酸酒精分化數秒,自來水沖洗,氨水返藍,流水沖洗。

          9、 脫水封片:將切片依次放入75%酒精6min-85%酒精6min --無水乙醇Ⅰ6min -無水乙醇Ⅱ6min -二甲苯Ⅰ5min 中脫水透明,將切片從二甲苯拿出來稍晾干,中性樹膠封片。

         10、 顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。








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