氣相色譜-質譜聯用法：G/香草醛/香蘭素檢測

氣質聯用（GC-MS）技術結合了氣相色譜（GC）強大的分離能力和質譜（MS）的定性定量能力，用于檢測 G / 香草醛 / 香蘭素。其原理是：樣品中的 G / 香草醛 / 香蘭素在氣相色譜柱中，根據各組分在固定相和流動相（載氣）之間的分配系數差異實現分離，按一定順序依次流出色譜柱。隨后，分離后的組分進入質譜儀，在離子源中被電離成帶電離子，這些離子經質量分析器按質荷比（m/z）不同進行分離，檢測器記錄離子的相對強度，形成質譜圖。

通過將樣品的質譜圖與標準物質的質譜圖或質譜數據庫中的圖譜進行比對，可實現對 G / 香草醛 / 香蘭素的定性分析；同時，根據其特征離子的峰面積與濃度的線性關系（外標法），可完成定量分析。

儀器與試劑

（一）儀器

氣相色譜 - 質譜聯用儀（GC-MS）：配備分流 / 不分流進樣口、毛細管色譜柱（如 DB-5MS，30m×0.25mm×0.25μm）、電子轟擊離子源（EI）、質量分析器（如四極桿）。

天平：精度為 0.0001g。

超聲波提取儀。

高速離心機（轉速≥10000r/min）。

氮吹儀。

移液器（10μL、100μL、1mL 等）。

容量瓶（1mL、10mL、50mL、100mL 等）。

離心管（10mL、50mL）。

微孔濾膜（0.22μm，有機相）。

進樣瓶（2mL，帶硅膠墊）。

（二）試劑

G / 香草醛 / 香蘭素標準品：純度≥98%。

正己烷：色譜純。

乙酸乙酯：色譜純。

甲醇：色譜純。

無水硫酸鈉：分析純，經 650℃灼燒 4h，冷卻后備用。

超純水：由 Milli-Q 系統制備。

標準溶液的配制

儲備液的配制：分別準確稱取一定量的 G、香草醛、香蘭素標準品，用甲醇溶解并定容至 100mL 容量瓶中，配制成濃度為 1.0mg/mL 的單標儲備液，置于 - 20℃冰箱中避光保存，有效期為 6 個月。

混合中間液的配制：分別準確移取 1.0mL 上述各單標儲備液于 100mL 容量瓶中，用甲醇稀釋定容，配制成濃度為 10μg/mL 的混合中間液，置于 4℃冰箱中避光保存，有效期為 1 個月。

工作標準溶液的配制：分別準確移取 0.1mL、0.5mL、1.0mL、5.0mL、10.0mL 混合中間液于 10mL 容量瓶中，用正己烷 - 乙酸乙酯（體積比 9:1）混合溶液稀釋定容，配制成濃度為 0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL 的系列工作標準溶液，現配現用。

樣品處理

樣品采集與保存：根據檢測對象（如食品、植物提取物、香料等）采集具有代表性的樣品，置于潔凈容器中，-20℃冰箱中保存，避免成分揮發或降解。

樣品提取：稱取 5.0g 樣品于 50mL 離心管中，加入 10mL 正己烷 - 乙酸乙酯（體積比 9:1）混合提取液，渦旋混合 2min，超聲提取 20min（功率 250W，溫度 30℃）。

凈化：向提取液中加入 2g 無水硫酸鈉，渦旋 1min，靜置 5min，以 10000r/min 離心 10min，取上清液于另一離心管中。

重復提取：向殘渣中再加入 8mL 上述混合提取液，重復提取、凈化步驟，合并兩次上清液。

濃縮：將合并的上清液轉移至氮吹管中，用氮吹儀在 40℃下吹至近干，加入 1mL 正己烷 - 乙酸乙酯（體積比 9:1）混合溶液復溶，渦旋混合 1min。

過濾：將復溶后的溶液通過 0.22μm 有機相微孔濾膜過濾，濾液收集于 2mL 進樣瓶中，待測。

GC-MS 檢測條件

（一）氣相色譜條件

色譜柱：DB-5MS 毛細管柱（30m×0.25mm×0.25μm）。

進樣口溫度：250℃。

載氣：氦氣（純度≥99.999%），流速 1.0mL/min（恒流模式）。

進樣方式：分流進樣，分流比 10:1。

進樣量：1μL。

柱溫程序：初始溫度 60℃，保持 1min；以 10℃/min 升溫至 200℃，保持 2min；再以 20℃/min 升溫至 280℃，保持 5min。

（二）質譜條件

離子源：電子轟擊離子源（EI），電子能量 70eV。

離子源溫度：230℃。

接口溫度：280℃。

質量掃描范圍：m/z 50-500。

溶劑延遲：3min。

檢測模式：選擇離子監測（SIM），G、香草醛、香蘭素的特征離子（定量離子 / 定性離子）分別為 [具體離子 1]/[具體離子 2, 具體離子 3]、[具體離子 4]/[具體離子 5, 具體離子 6]、[具體離子 7]/[具體離子 8, 具體離子 9]（需根據實際標準品質譜圖確定）。

測定步驟

儀器預熱：開啟 GC-MS 儀器，進行預熱，待儀器真空度、溫度等參數達到穩定狀態（通常需 30-60min）。

標準曲線繪制：按照濃度由低到高的順序，依次將系列工作標準溶液注入 GC-MS 儀器中，每個濃度重復進樣 3 次，記錄各目標物定量離子的峰面積。以工作標準溶液的濃度為橫坐標，平均峰面積為縱坐標，分別繪制 G、香草醛、香蘭素的標準曲線。

樣品測定：將處理好的樣品溶液注入 GC-MS 儀器中，按照上述檢測條件進行測定，記錄各目標物定量離子的峰面積。每個樣品重復進樣 3 次，取平均峰面積。