酶水解 - 高效液相色譜熒光法檢測(cè)花生色氨酸的含量

花生是我國(guó)重要的油料和經(jīng)濟(jì)作物，種植面積約 480 萬(wàn)公頃，總產(chǎn)量約 1800 萬(wàn)噸?；ㄉ讶什粌H富含多不飽和脂肪酸、蛋白質(zhì)、碳水化合物、白藜蘆醇、植物甾醇和維生素，同時(shí)含有色氨酸等功能性氨基酸成分。

色氨酸（Tryptophan），分子式為C11H12N2O2，分子量為204.23 Da，是一種含有芳香環(huán)結(jié)構(gòu)的人體必需氨基酸。色氨酸無(wú)法在人體內(nèi)自主合成，只能通過(guò)食物攝取，能夠促進(jìn)人體生長(zhǎng)發(fā)育，提升免疫力，調(diào)節(jié)晝夜節(jié)律，改善睡眠質(zhì)量，對(duì)人體具有重要的生理活性功能。

色氨酸作為人體必需的氨基酸之一，參與多種生理過(guò)程，如蛋白質(zhì)合成、神經(jīng)遞質(zhì)合成等，對(duì)維持人體正常生理功能至關(guān)重要?；ㄉ且环N營(yíng)養(yǎng)豐富的食品，富含蛋白質(zhì)、油脂、維生素等多種營(yíng)養(yǎng)成分，其中色氨酸的含量是評(píng)估花生營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的重要指標(biāo)之一。

目前，色氨酸的檢測(cè)方法主要包括分光光度法、氨基酸分析儀法和高效液相色譜法等。分光光度法操作簡(jiǎn)便，但靈敏度較低，且易受其他物質(zhì)干擾；氨基酸分析儀法雖然準(zhǔn)確性高，但儀器成本昂貴，分析費(fèi)用較高；高效液相色譜法則以其高分離效率和快速分析等優(yōu)勢(shì)，在氨基酸檢測(cè)中得到了廣泛應(yīng)用。然而，花生中的色氨酸大多以蛋白質(zhì)結(jié)合態(tài)存在，直接采用高效液相色譜法難以準(zhǔn)確測(cè)定其含量，因此需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理。酶水解法是一種溫和的樣品預(yù)處理方法，能夠在不破壞色氨酸結(jié)構(gòu)的前提下，將蛋白質(zhì)結(jié)合態(tài)的色氨酸釋放出來(lái)。結(jié)合高效液相色譜熒光法，有望實(shí)現(xiàn)對(duì)花生中色氨酸含量的精確測(cè)定。

酶水解主要應(yīng)用于大豆、葵花籽、南瓜、小米、紫菜等食用 農(nóng) 產(chǎn) 品 ，食 品 安 全 國(guó) 家 標(biāo) 準(zhǔn)《GB 5009. 294- 2023 食品中色氨酸的測(cè)定》采用酶水解-液相色譜 法測(cè)定嬰幼兒配方食品、特殊醫(yī)學(xué)用途配方食品中色氨酸含量 。研究表明色氨酸廣泛存在于糧油作物產(chǎn)品，針對(duì)色氨酸的分析方法逐漸成為農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)營(yíng)養(yǎng)功能成分研究熱點(diǎn)。

采用酶水解-高效液相色譜熒光法分析花生色氨酸含量，優(yōu)化了水解酶種類(lèi)、酶水解條件和色譜分離參數(shù)，前處理步驟簡(jiǎn)單、水解條件溫和、效率高，能夠滿足花生等油料色氨酸精準(zhǔn)檢測(cè)。