沒食子酸含量檢測--高效液相

沒食子酸又名五倍子酸，是一種有機酸，多酚類有機物。名稱為3,4,5-三羥基苯甲酸，化學式為C7H6O5。它廣泛存在于五倍子、漆樹、掌葉大黃、大葉桉、山茱萸等植物中。沒食子酸易溶于水、醇和醚；具有酚及羧酸的性質(zhì)。制備方法有酸水解法、堿水解法、發(fā)酵法、酶法等，在制藥、墨水、染料、食品、有機合成等方面有廣泛的應(yīng)用。沒食子酸是中藥材提取物，具有多種生物活性，比如抗炎、抗氧化、抑菌等作用。沒食子酸與三價鐵離子生成藍黑色沉淀，是藍黑墨水的原料。

高效液相色譜法（HPLC）是檢測沒食子酸含量的常用方法。

色譜條件：反相C18色譜柱，柱溫25℃；以甲醇和0.5%的磷酸為流動相，流速0.8-1ml/min，進樣量10-20ul；紫外檢測器，波長273nm。確保具有良好的線性關(guān)系和回收率，標準偏差在規(guī)定的范圍內(nèi)。 樣品制備：精密稱量樣品1g，置于50ml容量瓶中，加入30ml甲醇，超聲1h。加入甲醇，定容到刻度，搖勻，過濾。 標準品制備：稱取沒食子酸標準品2mg，放入50ml容量瓶中，用甲醇定容到刻度，搖勻備用。 標準曲線制作：梯度稀釋沒食子酸標準品，至少6個點，分別用甲醇定容到刻度，搖勻。以上述的色譜條件，進樣到hplc，測定色譜圖，記錄數(shù)據(jù)。以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，制作標準曲線，計算回歸方程和回收率，確保具有良好的線性關(guān)系。 樣品測定和計算：在色譜條件下，吸取樣品樣品溶液10ul，進樣測定色譜峰面積。如果濃度過高，先稀釋，再進樣，確保峰面積在標準曲線范圍內(nèi)。根據(jù)回歸方程和樣品的色譜峰面積，可以計算出樣品沒食子酸的含量，考慮回收率。