無血清細胞凍存液是一種特殊的細胞保存液。
1、成分明確：不含動物來源性蛋白和血清，有效減少細菌、病毒和支原體等污染風(fēng)險。
2、高安全性：由于不含有異源成分，因此具有更高的安全性，適用于體內(nèi)研究。
3、細胞存活率高：含有DMSO、葡萄糖等細胞營養(yǎng)成分，有助于提高細胞的存活率和活力。
4、適用性廣：通用于各種動物細胞株，包括腫瘤細胞和常規(guī)細胞，也適用于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。
正確使用無血清細胞凍存液的步驟如下：
1、細胞收集與離心：
使用常規(guī)方法收集處于對數(shù)生長期的細胞。
對于貼壁細胞，使用胰酶或EDTA消化，收集到試管中。
將細胞懸浮液離心，通常條件為1000-2000rpm，4℃，持續(xù)3-5分鐘，保留細胞沉淀。
2、加入凍存液與混合：
向細胞沉淀中加入適量的無血清細胞凍存液。
輕柔混合均勻，避免產(chǎn)生氣泡和剪切力，使細胞濃度達到適宜范圍。
3、分裝與凍存：
將混合均勻的細胞懸液分裝到冷凍保存管中。
直接放入-80℃超低溫冰箱中進行冷凍保存，或先-80℃過夜再轉(zhuǎn)移至液氮罐中。
4、注意事項：
操作過程需在超凈工作臺內(nèi)無菌進行。
加入細胞后應(yīng)盡快移至-80℃保存，減少室溫存放時間。
控制好胰酶的消化時間，避免消化過度。
重懸細胞時要輕柔且充分，避免細胞損傷和成團。
遵循上述步驟和注意事項，可以確保無血清細胞凍存液的正確使用，提高細胞凍存效果。
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