如何正確使用無血清細(xì)胞凍存液？

　　無血清細(xì)胞凍存液是一種特殊的細(xì)胞保存液‌。

　　

　　1、‌成分明確‌：不含動物來源性蛋白和血清，有效減少細(xì)菌、病毒和支原體等污染風(fēng)險(xiǎn)‌。

　　

　　2、‌高安全性‌：由于不含有異源成分，因此具有更高的安全性，適用于體內(nèi)研究‌。

　　

　　‌3、細(xì)胞存活率高‌：含有DMSO、葡萄糖等細(xì)胞營養(yǎng)成分，有助于提高細(xì)胞的存活率和活力‌。

　　

　　‌4、適用性廣‌：通用于各種動物細(xì)胞株，包括腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞，也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞‌。

　　

　　正確使用無血清細(xì)胞凍存液的步驟如下‌：

　　

　　1、‌細(xì)胞收集與離心‌：

　　

　　使用常規(guī)方法收集處于對數(shù)生長期的細(xì)胞。

　　

　　對于貼壁細(xì)胞，使用胰酶或EDTA消化，收集到試管中。

　　

　　將細(xì)胞懸浮液離心，通常條件為1000-2000rpm，4℃，持續(xù)3-5分鐘，保留細(xì)胞沉淀‌。

　　

　　2、‌加入凍存液與混合‌：

　　

　　向細(xì)胞沉淀中加入適量的無血清細(xì)胞凍存液。

　　

　　輕柔混合均勻，避免產(chǎn)生氣泡和剪切力，使細(xì)胞濃度達(dá)到適宜范圍‌。

　　

　　3、‌分裝與凍存‌：

　　

　　將混合均勻的細(xì)胞懸液分裝到冷凍保存管中。

　　

　　直接放入-80℃超低溫冰箱中進(jìn)行冷凍保存，或先-80℃過夜再轉(zhuǎn)移至液氮罐中‌。

　　

　　4、‌注意事項(xiàng)‌：

　　

　　操作過程需在超凈工作臺內(nèi)無菌進(jìn)行。

　　

　　加入細(xì)胞后應(yīng)盡快移至-80℃保存，減少室溫存放時(shí)間。

　　

　　控制好胰酶的消化時(shí)間，避免消化過度。

　　

　　重懸細(xì)胞時(shí)要輕柔且充分，避免細(xì)胞損傷和成團(tuán)‌。

　　

　　遵循上述步驟和注意事項(xiàng)，可以確保無血清細(xì)胞凍存液的正確使用，提高細(xì)胞凍存效果。